植物組織培養項目競賽規程
一、比賽範圍與參賽對象
生物工程系生物技術相關專業的教師及在籍學生。
二、比賽內容與方式
根據《教育部關於推進高等職業教育改革創新引領職業教育科學發展的若幹意見》教職成[2011]12號，高職院校必須將培養更大規模和更高質量的技能型人才、高端技能型人才作為建立現代高職教育體系，促進職業教育發展的戰略重點。本次大賽通過比賽實際操作，檢驗參賽選手在真實的工作環境與條件下進行植物組織培養技術操作能力和職業素質，促進我院緊貼產業需求培養植物現代良種繁育崗位技術人員。加快工學結合人才培養模式改革與創新的步伐，增強技能型人才的就業競爭力。
（一）操作技能考核
1．考核內容
在規定時間內完成植物組織培養繼代繁殖的操作，包括MS母液配製、MS固體培養基的製作和接種。
（1）MS母液配製（45 min）
根據表1配方進行計算（擴大倍數和母液體積按照大賽要求填寫），將結果填入表中，並配製相應溶液。
表1 母液配製配方
| 母液 | 成分 | 規定量(mg/L) | 擴大 倍數 |
稱取量(mg) | 母液體積(ml) | 配製1L培養基 吸取量（ml） |
| 鈣鹽 | CaCl2·2H2O | 440 | ||||
| 微量元素 | KI | 0.83 | ||||
| 激素 | NAA | 0.01mg/ml | - |
根據表2進行計算，並將結果填入表中。請利用提供的母液和材料，以MS+ 0.01 mg/L NAA+ 3%蔗糖+ 0.7%瓊脂，pH為5.8，配製培養基500 ml，並均勻分裝到12個培養瓶，不進行滅菌。培養瓶貼上標簽，註明培養基名稱、配製時間及選手參賽號。（表2中濃度由參賽選手按照比賽提供的母液標簽填寫）
表2 MS培養基配製
| 母液 | 濃度 | 配製體積（ml） | 母液吸取量（ml） | 稱取量（g） |
| 大量元素 | - | |||
| 鈣鹽母液 | - | |||
| 鐵鹽 | - | |||
| 微量元素 | - | |||
| 有機物 | - | |||
| 萘乙酸 | - | |||
| 蔗糖 | - | |||
| 瓊脂粉 | - |
在規定時間內，按無菌操作規範要求完成繼代瓶苗的轉瓶操作，每人接種15瓶培養基，每瓶轉接13個莖段，莖段長1-2 cm，帶1-2葉片，扡插到培養基中，均勻分布，無交叉汙染等動作（不足13個莖段的該瓶不計轉接瓶數）。
2.考核時間
考核時間為120分鐘。
（二）比賽方式
1.比賽為團體賽，須為同校在冊師生，由2名選手配合完成。
2.參賽隊在規定時間內，根據比賽題目的要求，以現場操作的方式，按照正確的操作步驟，在規定時間內完成植物組織培養繼代繁殖的操作。
三、比賽命題及裁判
（一）比賽命題
操作技能為比賽辦法中規定的實踐操作內容。
（二）裁判
聘請本院具有相關經驗的3名教師為裁判員。裁判工作按照公平、公正、客觀的原則進行。
四、比賽場地及設施
（一）比賽場地
盛煌娱乐實驗樓三樓（301室、302室）。
（二）技能比賽設備、藥品及用具
1.MS母液配製
氯化鈣（CaCl2·2H2O），碘化鉀（KI）、萘乙酸(NAA)、電子分析天平（感量0.0001g）1臺、電爐1只、電子天平（感量0.01g）1臺、燒杯、容量瓶、、玻璃棒3支、膠頭滴管2支、洗瓶2只、蒸餾水5L、95%酒精1瓶、0.1mol/L HCl 1瓶、0.1mol/L NaOH 1瓶、抹布1塊、稱量紙2包、卷紙1包、標簽紙1張、草稿紙2張、水芯筆1支、計算器1個、白色實驗工作服1件/人等。
2.MS培養基的配製
電磁爐1只、MS母液、瓊脂粉1瓶、蔗糖1瓶、搪瓷杯（500ml）1只、培養瓶12只、燒杯（500ml）1只、燒杯（200ml）1只、蒸餾水2L、洗瓶1只、量筒（50ml）1只、移液管、0.1mol/L HCl 1瓶、0.1mol/L NaOH 1瓶、pH試紙（5.0-7.0）1包、抹布1塊、稱量紙1包、卷紙1包、標簽紙1張、草稿紙2張、水芯筆1支、計算器1個等。
3.組培苗繼代繁殖的無菌操作
試管苗10瓶、培養基30瓶、雙人單面超凈工作臺1臺、剪刀4把、鑷子4把、酒精燈2只、無菌濾紙2包、75%酒精噴壺2個、一次性口罩2只、記號筆2支、接種服上衣2件等。
五、比賽規則和註意事項
（一）選手須知
1．參賽選手持學生證或身份證參加比賽。
2．參賽選手出場順序、位置、實驗動物由抽簽決定，不得擅自變更、調整。
3．參賽選手提前15分鐘檢錄進入賽場，並按指定比賽號參加比賽。遲到15分鐘者，取消比賽資格；比賽開始15分鐘後，選手方可離開賽場。
4．選手應在競賽試卷或實物標簽上填寫比賽號。試卷（或實物標簽）上不得有任何暗示選手身份的記號和符號，否則取消成績。
5．選手在比賽過程中不得擅自離開賽場，如有特殊情況，需經裁判同意。選手若需休息、飲水或去洗手間等，耗用時間計算在比賽時間內。
6．比賽結束時，參賽選手應立即停止操作，不得以任何理由拖延比賽時間。選手操作完成後，在《實際操作現場記錄表》上簽名確認，方可離開賽場。
（二）註意事項
1.參賽對象必須是在冊師生。
2.參賽選手須按規定的時間報到、比賽。
3.遵守紀律，尊重評委，服從指揮。
六、成績評定
操作技能考核采用百分製計分，依據操作規範和熟練程度對3項操作技能分別計分，總成績滿分為100分。操作技能由裁判統一評分，稱量、定容、pH測定終止舉手示意裁判確認，否則該項操作不計分。考核要點和分值如下：
植物組織培養項目考核要點與分值
| 序號 | 考核內容 | 考核要點（評分細則） | 分值 | ||
| 1 | 母液 配製 |
計算 | 計算填空（每空1分） | 5 | |
| 試劑稱量 | 1.天平零點和水平檢查（1分）、托盤清掃（1分）； 2.稱量操作規範（2分）； 3.試劑、樣品灑落（2分）； 4.重稱（2分）； 5.稱樣量範圍（1分）； 6.稱量結束工作，試劑、凳子歸位、天平復位（1分）。 |
10 | |||
| 溶液配製 | 1.玻璃棒攪拌正確（1分）； 2.試劑完全溶解（1分）； 3.加水至容量瓶約3/4時平搖（1分）； 4.加水至近標線約1cm處等待1～2min（1分）； 5.定容熟練（1分）、體積準確（1分）； 6.搖勻操作準確（1分）； 7.溶液灑出（2分）； 8.貼好標簽（1分）。 |
10 | |||
| 分工協作 | 分工合理，相互協作，完成速度快 | 5 | |||
| 2 | 培養基配製 | 計算 | 計算填空(每空1分) | 8 | |
| 配製 | 1.移液工具選擇正確（1分）； 2.一次性吸取，液體不能進到吸氣球裏（1分）； 3.數量準確（1分）； 4.移出時不滴不漏，桌面不濕（1分）； 5.移進時吹凈（1分）。 6.瓊脂完全溶解（1分）； 7.定容準確（2分）； 8.pH值測定、調節正確（1分）； 9.熟練操作（1分）。 |
10 | |||
| 熬製與分裝 | 1.熬煮火適中，攪拌及時，瓊脂充分熔化（1分）； 2.定容準確（1分）； 3.pH值調節正確（1分）； 4.分裝迅速，均勻且不沾瓶口，臺面潔凈（2分，沾瓶口或濺出每瓶扣1分，扣完為止）； 5.具協調組織能力（1分）； 6.貼好標簽、標簽內容準確（1分）。 |
7 | |||
| 配製效果及 分工協作 |
1.培養基效果（3分）。高壓冷卻後培養基未凝固則本項不得分；培養基凝固但硬度偏大或偏軟則本項扣2分。2. 分工合理，相互協作，完成速度快。（3分） | 6 | |||
| 3 | 無菌 操作 |
無菌操作 | 1.講究個人衛生、洗凈雙手、手部無飾品等雜物（2分）； 2.使用75%酒精消毒，順序正確、全面、徹底、熟練（2分）； 3.使用滅菌器程序正確，消毒滅菌徹底（2分）； 4.接種用具擺放合理，在有效區域內操作（2分）； 5.操作正確，切割速度快，接塊大小合適（4分）； 6.接種動作正確，速度快、熟練，瓶口始終保持在有效滅菌區域內（12分）； 7.接種數量適宜，布局合理，方向正確，深淺適度，整齊（5分）； 8.接種完成後清理接種垃圾，保證工作臺幹凈，臺上的物品擺放整齊（2分）。 |
31 | |
| 定量 | 在規定的時間內接種完規定的數量，少接一瓶扣1分，扣完為止；扡插到培養基的莖段必須帶有葉片，否則該瓶不計分。 | 5 | |||
| 文明操作與安全 | 操作文明、安全（1分），工作臺場地清潔幹凈（1分），用具擺放整齊（1分）。 | 3 | |||
| 合 計 | 100 | ||||
1．參賽選手對不符合比賽規定的實驗材料，有失公正的檢測、評判、獎勵，以及對工作人員的違規行為等，均可提出申訴。
2.選手申訴均須在本賽項結束後1小時內以書面形式向大賽執委會仲裁組提出。仲裁組將認真負責地受理選手申訴，並將處理意見通知系部和當事人。
3．大賽執行委員會仲裁組的裁決為最終裁決。
八、其他
本比賽辦法最終解釋權歸盛煌職業技能大賽執行委員會。
